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全自動(dòng)生物發(fā)酵罐的操作步驟

發(fā)布時(shí)間:2025-8-14
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  一、前期準(zhǔn)備與空消‌
 
  ‌1、設(shè)備檢查‌:確認(rèn)罐體、管路(空氣/蒸汽/冷卻水/排污)、閥門密封性及電源連接正常,攪拌系統(tǒng)無異常。
 
  ‌2、空罐滅菌(空消)‌:通入飽和蒸汽(121°C)對罐體及管路滅菌20分鐘,結(jié)束后通無菌空氣保壓(0.15MPa),防止污染。
 
  ‌3、培養(yǎng)基添加‌:將滅菌后的發(fā)酵培養(yǎng)基加入罐內(nèi),定容至目標(biāo)體積(如50L)。
 
  ‌二、實(shí)消與參數(shù)設(shè)置‌
 
  ‌1、實(shí)罐滅菌(實(shí)消)‌:再次通蒸汽(121°C,20分鐘)徹底滅菌培養(yǎng)基,結(jié)束后維持無菌環(huán)境保壓。
 
  ‌2、參數(shù)校準(zhǔn)‌:校正pH電極和溶氧電極(DO),滿刻度校準(zhǔn)溶氧值至100%。設(shè)定溫度、攪拌轉(zhuǎn)速范圍(如200-800r/min)、pH目標(biāo)值(如7.0)及補(bǔ)料聯(lián)動(dòng)參數(shù)。
 
  ‌三、接種操作‌
 
  ‌1、無菌環(huán)境控制‌:關(guān)閉門窗及通風(fēng)設(shè)備,減少空氣流動(dòng)。操作人員佩戴無菌手套,用酒精棉擦拭接種口。
 
  ‌2、火焰圈接種‌:點(diǎn)燃火焰圈保護(hù)接種口,在火焰掩護(hù)下拔除護(hù)套,通過壓差法(罐壓0.15MPa→0.05MPa波動(dòng))將種子液快速接入罐內(nèi),立即密封。
 
  ‌四、發(fā)酵過程控制‌
 
  ‌1、環(huán)境維持‌:保持恒溫(如37°C)、穩(wěn)定攪拌(根據(jù)菌種需求)、通氣量(如1VVM),自動(dòng)補(bǔ)加酸堿/消泡劑。
 
  ‌2、監(jiān)測與記錄‌:每小時(shí)記錄pH、DO、溫度、罐壓;定期取樣檢測菌體濃度及雜質(zhì);觀察泡沫情況,及時(shí)添加消泡劑。
 
  ‌五、結(jié)束與清洗‌
 
  ‌1、放料‌:發(fā)酵完成后通知下游工序,蒸汽吹洗管道后開啟出料閥排出發(fā)酵液。
 
  ‌2、罐體清洗‌:高壓水槍沖洗罐壁,頑固殘留用10%堿液90°C煮洗30分鐘;排污后通風(fēng)干燥。
 
  ‌3、電極保養(yǎng)‌:pH電極用3mol/L KCl溶液浸泡,DO電極通電維護(hù)。
 
  ‌4、檢修試漏‌:罐體保壓0.15MPa,用肥皂水檢測閥門/法蘭密封性,更換損壞墊片。
 
  ‌關(guān)鍵注意事項(xiàng)‌:全程嚴(yán)格無菌操作,避免雜菌污染;電極校準(zhǔn)直接影響工藝精度;火焰圈接種需快速精準(zhǔn),防止罐壓歸零。

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