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PDF 文件猴α干擾素(IFN-α)Elisa試劑盒實驗說明書
BS-4735 猴α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒
以下是猴α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒的實驗說明書綜合整理:
一、?實驗原理?
采用雙抗體夾心法:
包被抗IFN-α抗體的微孔板捕獲樣本中的IFN-α;
加入HRP標(biāo)記的檢測抗體形成復(fù)合物,TMB顯色后通過OD450nm測定濃度。
二、?試劑盒組成?
組分 規(guī)格/保存條件 說明
標(biāo)準(zhǔn)品 480pg/ml或2700ng/L凍干粉 需用稀釋液復(fù)溶
酶標(biāo)試劑 HRP標(biāo)記抗體(6ml) 避免強(qiáng)光照射
濃縮洗滌液 20-30倍濃縮液 使用前需蒸餾水稀釋
TMB底物/終止液 各6ml 終止液為2M硫酸
酶標(biāo)板 預(yù)包被抗體(96孔) 未用板條需密封防潮
三、?樣本處理要求?
血清/血漿?:
采集后室溫靜置10-20分鐘,2000-3000rpm離心20分鐘;
避免溶血或高血脂樣本,分裝保存于-20℃(短期)或-80℃(長期)。
細(xì)胞上清/組織勻漿?:
離心去除顆粒后取上清,組織需加PBS勻漿。
注意事項?:
含NaN3的樣本會抑制HRP活性,需避免使用。
四、?操作步驟?
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?:
原倍標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋至7個濃度(如15.625-1000pg/ml)。
加樣與孵育?:
每孔加樣50-100μl,37℃孵育1-2小時。
洗滌?:
使用稀釋后洗滌液,洗板4-6次并拍干。
顯色與終止?:
加TMB避光反應(yīng)15-30分鐘,終止后15分鐘內(nèi)檢測OD值。
五、?注意事項?
試劑保存?:
未開封試劑盒2-8℃保存,開封后酶標(biāo)板需-20℃密封。
操作規(guī)范?:
避免反復(fù)凍融樣本,溫育時保持溫度穩(wěn)定(±1℃);
不同批號試劑不可混用,底物變藍(lán)即失效。
數(shù)據(jù)計算?:
以標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合濃度,OD值超出范圍時需稀釋復(fù)測。
六、?技術(shù)支持?
部分廠商提供免費代測服務(wù)(如中科質(zhì)檢);
如需完整說明書,建議參考具體試劑盒附帶的文檔。
注:以上資料僅供參考,如需具體品牌產(chǎn)品完整說明,可參考對應(yīng)廠商提供的文檔。
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