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PDF 文件昆蟲(chóng)8羥基脫氧鳥(niǎo)苷(8-OHdG)Elisa試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
以下是昆蟲(chóng)8羥基脫氧鳥(niǎo)苷(8-OHdG)ELISA試劑盒的使用說(shuō)明,綜合了多個(gè)相關(guān)產(chǎn)品的操作流程和注意事項(xiàng):
一、試劑盒組成
預(yù)包被板(48T/96T)
標(biāo)準(zhǔn)品(凍干粉,通常含6管濃度梯度)
HRP標(biāo)記檢測(cè)抗體
樣本稀釋液、洗滌緩沖液(20×濃縮液)
底物A/B、終止液
封板膜、自封袋等耗材
二、樣本處理
體液樣本?(如血淋巴):
采集后室溫靜置10-20分鐘,離心(2000-3000 rpm,20分鐘)取上清
避免反復(fù)凍融,-20℃保存?zhèn)溆?/p>
組織樣本?:
需制成勻漿,離心后取上清液檢測(cè)
三、操作步驟
試劑準(zhǔn)備?:
標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶:每管加0.5 mL樣本稀釋液,靜置10分鐘溶解
洗滌液稀釋:1份20×濃縮液加19份蒸餾水
加樣?:
標(biāo)準(zhǔn)品孔:直接加50 μL梯度標(biāo)準(zhǔn)品
樣本孔:先加10 μL待測(cè)樣本,再加40 μL稀釋液(最終稀釋5倍)
孵育?:
加入HRP標(biāo)記抗體100 μL/孔,37℃孵育60分鐘
洗板5次(手工或洗板機(jī))
顯色與終止?:
每孔加底物A/B各50 μL,37℃避光顯色15分鐘
加終止液50 μL,15分鐘內(nèi)測(cè)OD450值
四、注意事項(xiàng)
試劑盒需平衡至室溫后使用,未用完板條需密封保存于4℃
避免使用NaN3防腐劑,會(huì)抑制HRP活性
顯色時(shí)間需嚴(yán)格控制,避免過(guò)度反應(yīng)
建議做復(fù)孔檢測(cè),板內(nèi)變異系數(shù)應(yīng)<10%
五、結(jié)果計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo)繪制曲線,通過(guò)線性回歸方程計(jì)算樣本濃度。若樣本OD值超出標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍,需適當(dāng)稀釋后重測(cè)。
如需具體產(chǎn)品的完整說(shuō)明書(shū),建議聯(lián)系供應(yīng)商獲取對(duì)應(yīng)昆蟲(chóng)種屬的試劑盒文檔。
注:以上資料僅供參考,具體請(qǐng)咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。
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