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PDF 文件以下是?猴α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒?的實驗說明書核心內(nèi)容整理,綜合多個高可信度來源:
一、實驗原理?
采用?雙抗體夾心法?:
用純化的猴IFN-α抗體包被微孔板,依次加入樣本、HRP標記的檢測抗體,形成復合物后通過TMB顯色,顏色深淺與IFN-α濃度正相關?。
二、試劑盒組成?
組件 規(guī)格/說明
預包被板 96孔板(12孔×8條)?
標準品 凍干粉(如480pg/ml),需稀釋液重構(gòu)?
HRP標記抗體 含檢測抗體、顯色劑A/B液、終止液?
濃縮洗滌液 30倍稀釋使用(需蒸餾水配制)?
輔助材料 封板膜、密封袋、說明書?
三、樣本處理?
血清/血漿?
室溫靜置后離心(2000-3000g,20分鐘),避免溶血或脂血?。
長期保存需-20℃,?避免反復凍融??。
組織勻漿?
用PBS(含蛋白酶抑制劑)勻漿后離心取上清,建議稀釋后檢測?。
四、操作步驟?
標準品稀釋?
梯度稀釋(如480→240→120→60→30→15 pg/ml),空白孔用稀釋液?。
加樣與孵育?
每孔加50μL樣本或標準品,37℃孵育30-60分鐘?。
洗滌?
手工洗板需拍干,重復5次;洗板機建議清洗5次?。
顯色與終止?
加TMB避光反應15分鐘,終止后15分鐘內(nèi)測450nm OD值?。
五、注意事項?
環(huán)境控制?:顯色階段需避光,試劑使用前室溫平衡15-30分鐘?。
干擾物?:避免含NaN3的樣本(抑制HRP活性)?。
質(zhì)量控制?:建議標準品和樣本做復孔,CV值應<15%?。
六、技術參數(shù)?
項目 參數(shù)范圍
檢測范圍 6.25-1000pg/ml(不同品牌有差異)?
靈敏度 通常<15pg/ml?
有效期 未開封2-8℃保存6個月,開封板條需密封防潮?
如需完整說明書或操作視頻,建議聯(lián)系供應商獲取隨貨文件?。
注:以上資料僅供參考,不同品牌產(chǎn)品可能存在設計差異,操作前建議參考說明書?。
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