【??參數(shù)信息】
英文名稱：Acid-fast Stain Kit （金胺O熒光法）
生產(chǎn)廠商：西安強(qiáng)化生物科技
【簡單概述】
分枝桿菌、麻風(fēng)桿菌等抗酸性菌，因其菌體表面有一層類脂或脂質(zhì)皮膜而不易著色，但一經(jīng)著色后，就很難被酸性脫色液脫色。
利用此特性，使用增強(qiáng)染色液對抗酸性菌染色，并以酸性脫色液加以脫色處理，使其脫色后再進(jìn)行對比染色。
抗酸性菌保留開始染色液的顏色，則易于鑒別區(qū)分。
本Acid-fast Stain Kit （金胺O熒光法），無需加熱，與傳統(tǒng)的抗酸熱染液相比操作較安全和簡單。
染色原理在于室溫條件用金胺O染色以及復(fù)染后，用含紫外光源的熒光顯微鏡檢測，抗酸性菌呈亮黃色，而其他細(xì)菌及背景物質(zhì)呈暗黃色，此種方法可用低倍鏡檢測，能快速的找出抗酸性菌。
傳統(tǒng)方法：Ziehl-Neelsen（熱染）和Kinyoun（冷染）需明場顯微鏡，操作復(fù)雜耗時。
金胺O-羅丹明法：部分產(chǎn)品添加羅丹明增強(qiáng)熒光，但核心原理相同。
【使用方法】
痰液/細(xì)菌涂片：用接種環(huán)挑取樣本，均勻涂布于載玻片上，加熱固定（80°C烘箱15分鐘或火焰快速固定）。
石蠟切片：需經(jīng)二甲苯脫蠟（5-10分鐘×2次）、梯度乙醇（無水→90%→70%）水化，最后蒸餾水沖洗。
細(xì)胞培養(yǎng)物：貼壁細(xì)胞用無EDTAyi酶消化后離心收集，懸浮細(xì)胞直接離心；PBS洗滌2次，重懸于緩沖液。
試劑B：酸性脫色液（如0.5%鹽酸乙醇或3%鹽酸酒精）
自備材料：載玻片、接種環(huán)、蒸餾水、熒光顯微鏡（需紫外光源及特定濾光片，如K530激發(fā)濾片/BG12屏障濾片）。
滴加金胺O染色液（試劑A）覆蓋樣本，室溫避光染色 10-15分鐘。
滴加酸性脫色液，作用 30秒至5分鐘（不同配方時間差異大），直至載玻片無黃色殘留。
滴加復(fù)染液，室溫避光染色 2分鐘（嚴(yán)格控制時間，過長會淬滅熒光）。
【相關(guān)試劑】
FCCP(50mM)凋亡誘導(dǎo)劑/質(zhì)子載體
Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit
Acid-fast Stain Kit(Ziehl-Neelsen Method)
Acid-fast Stain Kit(Kinyoun Cold Method)
Acid-fast Stain Kit(Auramine O Method)
Acid-fast Stain Kit(Auramine O-Rhodamine Method)
Annexin V-Alexa Fluor 488/PI Apoptosis Detection Kit
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