【??參數(shù)信息】
英文名稱：Texas Red labeled Lycopersicon Esculentum (Tomato) Lectin (LEL, TL)
糖特異性：[GIcNAc]1-3，N-乙酰葡萄糖胺
【簡單概述】
本產(chǎn)品德克薩斯紅標記的番茄凝集素具有適當數(shù)量的熒光染料，結(jié)合為該凝集素提供染色特性。
該綴合物基本上不含為綴合的熒光染料。激發(fā)在595nm，發(fā)射在615nm。
LEL是一種穩(wěn)定的單亞基糖蛋白，由約50%的阿拉伯糖和半乳糖組成，在溶液中可能形成多聚體。
其糖結(jié)合特異性主要針對[GlcNAc]β1-3-N-乙酰葡糖胺，并能與血型糖蛋白和Tamm-Horsfall糖蛋白結(jié)合。
盡管與馬鈴薯凝集素、曼陀羅凝集素和麥胚凝集素有部分相似性，但其結(jié)合特性存在差異。
Texas Red是一種熒光染料，標記后形成LEL-熒光團偶聯(lián)物，呈亮紅色，激發(fā)波長約595 nm，發(fā)射波長約615 nm（與Texas Red濾光片兼容）。
偶聯(lián)物經(jīng)過優(yōu)化，染料結(jié)合比例適當，確保染色效果，且?guī)缀醪缓坞x熒光染料。
【使用方法】
溶解沉淀：若長期儲存后出現(xiàn)沉淀，需在37°C下加熱溶解（避免高溫破壞活性）。
離心去雜質(zhì)：使用前以15,000 rpm、4°C離心30分鐘，去除顆粒物（尤其適用于細胞染色）。
稀釋溶劑：推薦用PBS（磷酸鹽緩沖液）稀釋，部分產(chǎn)品建議含0.2 mg/ml肝素（防止非特異性結(jié)合）。
工作濃度：推薦5–20 µg/ml（根據(jù)實驗優(yōu)化調(diào)整）。
儲存液濃度：商品化產(chǎn)品通常為1–2 mg/ml。
石蠟/冰凍切片脫蠟、水化，或新鮮組織切片固定（如4%多聚甲醛）。
將稀釋后的LEL-Texas Red（5–20 µg/ml）滴加于切片，覆蓋樣本。
避光孵育：室溫或4°C孵育5–45分鐘（時間依樣本類型調(diào)整）。
用冷PBS洗滌3次，每次5分鐘（去除未結(jié)合凝集素）。
封片劑（如VECTASHIELD®）封固，避光保存。
熒光顯微鏡檢測：激發(fā)波長 595–604 nm，發(fā)射波長 606–615 nm（紅色熒光）。
將LEL-Texas Red稀釋至5–20 µg/ml，溶于生理緩沖液（如PBS或人工腦脊液）。
活體灌注：通過尾靜脈或心內(nèi)注射注入嚙齒類動物，循環(huán)10–30分鐘。
離體灌注：離體器官灌注系統(tǒng)注入，確保均勻分布。
灌注后取組織，制備切片或整體透明化（如ECi/EGi法）。
血液/組織樣本用PBS洗滌，含肝素（0.2 mg/ml）防凝。
組織需yi酶分散（≤10分鐘，保留糖鏈結(jié)構(gòu)）。
細胞重懸于1/250稀釋的LEL-Texas Red（約8 µg/ml）中。
加10倍體積冷PBS，1500 rpm離心5分鐘，重復(fù)兩次。
流式細胞儀分選（Ex/Em: 595/615 nm）或顯微觀察。
【相關(guān)試劑】
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