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ATCC15834農(nóng)桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞

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參  考  價(jià):500 - 15000 /mg
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 產(chǎn)品型號(hào)

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    其他品牌

  • 廠商性質(zhì)

    生產(chǎn)商

  • 所在地

    西安市

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更新時(shí)間:2025-09-01 08:40:52瀏覽次數(shù):25次

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經(jīng)營(yíng)模式:生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品:374條

所在地區(qū):陜西西安市

聯(lián)系人:李杰 (經(jīng)理)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

ATCC15834農(nóng)桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞,為植物轉(zhuǎn)化設(shè)計(jì),攜帶pRi15834質(zhì)粒,誘導(dǎo)藥用植物毛狀根。經(jīng)工藝優(yōu)化,適合大質(zhì)粒轉(zhuǎn)化,轉(zhuǎn)化效率高,操作簡(jiǎn)便,低溫運(yùn)輸,-20℃避光儲(chǔ)存。

詳細(xì)介紹

【??參數(shù)信息】

英文名稱(chēng):ATCC15834 Electrocompetent Cell

中文名稱(chēng):ATCC15834農(nóng)桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞

運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸

規(guī)格:10×50μl,50×50μl

純度:≥95%

儲(chǔ)存條件:-20℃避光干燥

生產(chǎn)廠商:西安強(qiáng)化生物科技

【簡(jiǎn)單概述】

ATCC15834農(nóng)桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞是一種發(fā)根農(nóng)桿菌菌株,其核心特征包括:

基因型:攜帶天然 pRi15834 農(nóng)桿堿型Ri質(zhì)粒,賦予其特定的植物轉(zhuǎn)化能力。

宿主范圍:適用于多種植物(雙子葉植物和部分單子葉植物),專(zhuān)長(zhǎng)于誘導(dǎo)藥用植物的毛狀根。

制備工藝:經(jīng)特殊工藝優(yōu)化,適合大質(zhì)粒轉(zhuǎn)化(如基因組文庫(kù)),轉(zhuǎn)化效率高。

【使用方法】

一、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備

安全防護(hù):穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

電擊杯處理:

將0.1 cm電擊杯和杯蓋從75%乙醇儲(chǔ)存液中取出,倒置于干凈吸水紙上5分鐘瀝干水分,再正置5分鐘使乙醇充分揮發(fā)。

立即插入碎冰中壓實(shí),杯頂離冰面0.5 cm以便蓋蓋,冰浴5分鐘充分降溫。

感受態(tài)細(xì)胞解凍:取-80℃保存的感受態(tài)細(xì)胞插入冰中5分鐘,待融化。

二、質(zhì)粒與感受態(tài)細(xì)胞混合

質(zhì)粒要求:

質(zhì)粒DNA需用試劑盒抽提,雙蒸水溶解。

用量建議:使用需預(yù)實(shí)驗(yàn)優(yōu)化,推薦0.01-1 μg質(zhì)粒DNA/100 μl感受態(tài)細(xì)胞。

混合操作:

將質(zhì)粒加入解凍的感受態(tài)細(xì)胞中,用移液槍輕輕吹打混勻(避免氣泡)。

冰上靜置5分鐘。

三、電轉(zhuǎn)操作

電擊參數(shù)設(shè)置:

電容(C)= 25 μF,電阻(PC)= 200 ohm,電壓(V)= 2400 V(Bio-rad電轉(zhuǎn)儀參考參數(shù))。

電擊步驟:

將混合液快速轉(zhuǎn)移至預(yù)冷的電擊杯中,蓋緊杯蓋。

吸干電擊杯外壁水分,放入電轉(zhuǎn)槽。

啟動(dòng)電擊,完成后立即將電擊杯插回冰中冷卻2分鐘。

四、復(fù)蘇與培養(yǎng)

復(fù)蘇培養(yǎng):

向電擊杯中加入700 μl 無(wú)抗生素的TY液體培養(yǎng)基。

用移液槍吸出混合液,轉(zhuǎn)移至無(wú)菌離心管。

28℃、200 rpm振蕩培養(yǎng)2-3小時(shí)。

涂板與培養(yǎng):

6000 rpm離心1分鐘,棄上清(留約100 μl)。

輕輕吹打重懸菌體,涂布于含 Kan(50 μg/ml) 的TY平板上。

28℃倒置培養(yǎng)48-72小時(shí)。

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