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OverExpress C43(DE3)化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

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參  考  價(jià):￥500 - ￥15000 /mg
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 產(chǎn)品型號(hào)

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    其他品牌

  • 廠商性質(zhì)

    生產(chǎn)商

  • 所在地

    西安市

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更新時(shí)間：2025-09-01 08:41:28瀏覽次數(shù)：31次

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經(jīng)營(yíng)模式：生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品：374條

所在地區(qū)：陜西西安市

聯(lián)系人：李杰 （經(jīng)理）

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

OverExpress C43(DE3)化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞，兼容主流表達(dá)載體，特別適合膜蛋白與疏水性蛋白的高效生產(chǎn)。操作流程涵蓋解凍、轉(zhuǎn)化至誘導(dǎo)表達(dá)，關(guān)鍵步驟強(qiáng)調(diào)42℃精準(zhǔn)熱激45秒及25-30℃低溫誘導(dǎo)策略。

詳細(xì)介紹

【??參數(shù)信息】

英文名稱：OverExpress C43(DE3) Chemically Competent Cell

中文名稱：OverExpress C43(DE3)大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞，OverExpress C43(DE3)化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

規(guī)格：50×100μl，10x100ul

運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸。

純度：≥95%

儲(chǔ)存條件：-20℃避光干燥

生產(chǎn)廠商：西安強(qiáng)化生物科技

【簡(jiǎn)單概述】

OverExpress C43(DE3)是一種經(jīng)過(guò)基因工程改造的大腸桿菌（E. coli）菌株，專為高效表達(dá)毒性蛋白或疏水性蛋白而設(shè)計(jì)。

OverExpress C43(DE3)化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞，其核心特點(diǎn)包括：

起源與基因型：

源自BL21(DE3)菌株，通過(guò)篩選獲得至少兩個(gè)未知突變，這些突變使其能耐受并高效表達(dá)對(duì)普通大腸桿菌有毒的蛋白質(zhì)。

基因型為： F? ompT hsdSB (rB? mB?) gal dcm (DE3)。

功能定位：

用于表達(dá)真核/原核生物中的毒性蛋白（如膜蛋白、疏水性蛋白）及病毒、哺乳動(dòng)物等來(lái)源的重組蛋白。

兼容pET、pGEX、pMAL等T7啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的表達(dá)載體。

【使用方法】

一、細(xì)胞解凍與DNA混合

解凍感受態(tài)細(xì)胞：將C43(DE3)感受態(tài)細(xì)胞從-80°C冰箱取出，置于冰上緩慢解凍（約5-10分鐘）。

加入質(zhì)粒DNA：取50μL解凍細(xì)胞，加入1-5μL重組質(zhì)粒DNA（推薦質(zhì)粒濃度≤10 ng/μL），輕柔混勻后冰浴30分鐘。

二、熱激轉(zhuǎn)化

熱激處理：將混合液置于42°C水浴中精確熱激45秒，迅速放回冰浴2分鐘。

復(fù)蘇培養(yǎng)：加入450μL預(yù)熱的SOC或LB培養(yǎng)基，37°C、200 rpm振蕩培養(yǎng)60分鐘以恢復(fù)細(xì)胞活性。

三、涂板篩選

涂布抗生素平板：取100-200μL復(fù)蘇菌液涂布于含對(duì)應(yīng)抗生素的LB瓊脂平板。

培養(yǎng)：37°C倒置培養(yǎng)12-16小時(shí)，直至單菌落出現(xiàn)。

四、蛋白誘導(dǎo)表達(dá)

接種與培養(yǎng)：挑取單菌落接種至含抗生素的LB培養(yǎng)基，37°C振蕩培養(yǎng)至OD600≈0.6（對(duì)數(shù)中期）。

誘導(dǎo)條件：

誘導(dǎo)劑：加入IPTG（終濃度0.1-1 mM）。

溫度與時(shí)間：通常降低溫度至25-30°C，誘導(dǎo)4-16小時(shí)。

五、關(guān)鍵注意事項(xiàng)

菌株特性：

C43(DE3)衍生自BL21(DE3)，通過(guò)突變篩選獲得對(duì)膜蛋白毒性的高耐受性，尤其適合表達(dá)膜蛋白。

其轉(zhuǎn)錄組上調(diào)了膜蛋白生物合成相關(guān)基因，促進(jìn)正確折疊與膜整合。

質(zhì)粒選擇：避免使用含lacI的誘導(dǎo)型載體，以免抑制菌株的表達(dá)調(diào)控優(yōu)勢(shì)。

替代方案：若需更精細(xì)調(diào)控表達(dá)，可考慮Lemo21(DE3)菌株。

【相關(guān)試劑】

mFluor Red 780 酸

mFluor Violet 510 酸

mFluor Blue 585琥珀酰亞胺酯

iFluor 680 amine iFluor 680 胺

iFluor 680 hydrazide iFluor 680酰肼

Pan-caspase Inhibitor Z-VAD-FMK

Z-YVAD-FMK (Caspase-1 inhibitor)

Z-DEVD-FMK (Caspase-3 inhibitor)

CCCP (50 mM)凋亡誘導(dǎo)劑/質(zhì)子載體

Ac-DEVD-CHO (Caspase-3/7 inhibitor)

SYBR Green I Nucleic Acid Stain (PCR Grade, 10,000×)

EPI400 Electrocompetent cell 大腸桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞

以上資料由西安強(qiáng)化生物科技有限公司xxn整理！

本試劑僅適用于科研實(shí)驗(yàn)，敬請(qǐng)知悉。




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