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發(fā)布時(shí)間:2012-03-01
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1. 真空采血管的選擇:以往真空采血管的材質(zhì)多為玻璃材料,玻璃試管的主要成分是親水性硅酸鹽,采血后玻璃試管內(nèi)壁可出現(xiàn)吸附水分子的吸水層,所以分離膠不能直接黏附于玻璃試管的內(nèi)壁。隨著放置時(shí)間的延長(zhǎng),紅細(xì)胞中的鉀或者酶等物質(zhì),可以通過(guò)水分子吸水層向血清中擴(kuò)散。所以,玻璃采血管在原狀態(tài)下保存血清的期限以2~3d為宜。塑料采血管常為聚對(duì)苯二甲酸(乙二)醇酯(polyethyleneterephthalates,PET)材質(zhì),疏水性質(zhì)、其管壁不發(fā)生水分子層,分離膠可牢固地黏附著內(nèi)壁上,紅細(xì)胞中的鉀不能擴(kuò)散到血清中,因而冷藏保存8d血清鉀含量不變。PET塑料真空采血管可在-20℃保存標(biāo)本,這是普通塑料試管和玻璃試管難以達(dá)到所以,選擇真空采血管時(shí)盡量用PET塑料采血管為佳。
2. 推薦的采血順序: 凝血管(血清管)→枸櫞酸鈉管→肝素或EDTA管→草酸鉀-氟化鈉管→血沉管。主要原因是*管內(nèi)往往含有組織液,易造成凝血,不適于做血凝測(cè)定。
3. 取血時(shí)患者應(yīng)松弛,環(huán)境溫暖,防止靜脈攣縮,束膊時(shí)間不可過(guò)長(zhǎng),禁止拍打手臂,否則可造成局部血液濃縮或激活凝血系統(tǒng)。觀察采血是否順利,采血量是否符合要求。由于實(shí)驗(yàn)室樣本量的不斷增加,傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室分離血清標(biāo)本的速度與全自動(dòng)化分析儀很不同步,因?yàn)檠耗趟俣扰c玻璃試管和塑料試管的激活能力、溫度密切相關(guān)。實(shí)驗(yàn)證明,凝血因子中的Ⅺ、Ⅻ因子接觸玻璃試管壁后被激活,一般采血后在23~25℃室溫條件下,30min大部分血液已凝固,*凝固需要1h。但是,疏水性的塑料試管壁接觸凝血因子Ⅺ、Ⅻ時(shí),被激活的能力非常弱,需要2~4h血液才能*凝固,影響了分離血清的速度。在采血試管內(nèi)壁表面噴涂血液促凝劑才能解決上述存在的問(wèn)題。采血后輕輕倒轉(zhuǎn)試管混合4~5次,置室溫立放待血液*凝固后離心,血液呈現(xiàn)收縮狀態(tài),可觀察到有血清滲出現(xiàn)象,證明血液*凝固。
4. 血清分離膠促凝采血管離心操作的要求:如何正確地使用分離膠促凝管制備高質(zhì)量血清標(biāo)本,血液*凝固和離心條件是至關(guān)重要的兩個(gè)環(huán)節(jié),離心要求采用水平式離心機(jī)。具體操作步驟是:采血后立即輕輕倒轉(zhuǎn)采血試管4~5次混勻標(biāo)本,等待標(biāo)本充分凝固需要放置30min,離心半徑8cm,離心速度維持在3500~4000r/min離心10min。血清與血凝塊*被分離膠分離,血清標(biāo)本可直接上機(jī)檢測(cè)或轉(zhuǎn)移至儀器配套試杯中。具備這個(gè)條件才能制備出高品質(zhì)血清標(biāo)本,說(shuō)明分離膠效果好。如果離心速度過(guò)低,作用于分離膠的力比較弱,分離膠返轉(zhuǎn)不佳或者血液沒(méi)有*凝固就離心,可出現(xiàn)纖維蛋白凝狀物停留在血清中或膠體層中,有可能引起溶血,除急診外普通生化檢查在血液*凝固后離心效果交好。由于缺乏經(jīng)驗(yàn),這種現(xiàn)象在實(shí)驗(yàn)室初始使用分離膠凝采血管時(shí)經(jīng)常發(fā)生,如果有纖維蛋白絲停留于血清中很容易阻塞自動(dòng)分析儀采血針。目前許多國(guó)產(chǎn)分離膠質(zhì)量已達(dá)到或接近水平,許多醫(yī)院的使用表明和美國(guó)BD公司等同類產(chǎn)品的分離時(shí)間,分離效果幾乎沒(méi)有區(qū)別。經(jīng)用國(guó)產(chǎn)(友利)分離膠塑料試管,對(duì)生化、免疫30多個(gè)項(xiàng)目是否影響測(cè)定值作了調(diào)查,用普通玻璃試管做對(duì)照并和美國(guó)BD公司同類產(chǎn)品進(jìn)行比較實(shí)驗(yàn)研究,兩者之間具有很好的可比性,結(jié)果無(wú)顯著性差異(均p>0.05)。
5. 血液與抗凝劑的比例必須,抗凝劑在血標(biāo)本中的含量可改變血漿中鈣離子濃度進(jìn)而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。鈣的濃度越高,PT、APTT凝固時(shí)間越短。關(guān)于凝血試驗(yàn)真空管“死腔”問(wèn)題,有實(shí)驗(yàn)表明真空管死腔會(huì)產(chǎn)生血小板活性增強(qiáng)(PF4活性增強(qiáng))、APTT縮短現(xiàn)象的原因可能是多方面的,由于死腔激活血小板是隨機(jī)偶然事件,目前尚未對(duì)其發(fā)生機(jī)理和概率有明確的認(rèn)識(shí)。因此,在進(jìn)行血小板功能試驗(yàn)及監(jiān)測(cè)APTT以指導(dǎo)肝素抗凝治療時(shí)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生的偏差。
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