日韩国产高清无码|五月情网在线视频|青青一区二区三区|日韩无码视频魔豆|日本韩国国产无毛|欧美V成人V香蕉|老骚妇女一区二区|二区三区四区视频|最新亚洲在线一区|尤物一区二区在线

上海隆壘生物科技有限公司

主營(yíng)產(chǎn)品： elisa試劑盒說(shuō)明書(shū),elisa實(shí)驗(yàn),elisa原理

14
您現(xiàn)在的位置： 首頁(yè)> 資料下載> 單細(xì)胞凝膠電泳的操作步驟

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

免疫化學(xué)產(chǎn)品

血清

培養(yǎng)基

細(xì)胞

標(biāo)準(zhǔn)品

其他elisa試劑盒

兔elisa試劑盒

大鼠elisa試劑盒

小鼠elisa試劑盒

人elisa試劑盒

進(jìn)口試劑

公司信息

聯(lián)系人：
銷售部
地址：
上海市順義路18號(hào)綠地同創(chuàng)大廈2401室
郵編：
商鋪：
http://www.lolrenh.cn/st30518/
給他留言

單細(xì)胞凝膠電泳的操作步驟

2012-11-30　　

提 供 商 上海隆壘生物科技有限公司 資料大小 53KB
資料圖片 下載次數(shù) 78次
資料類型 WORD 文檔
【詳細(xì)說(shuō)明】　　單細(xì)胞凝膠電泳的操作步驟
　　
　　1、分離制備單細(xì)胞懸液
　　
　?。?）體外培養(yǎng)的細(xì)胞株：用胰酶消化，吹打成單細(xì)胞懸液。
　　
　?。?）體內(nèi)臟器細(xì)胞：處死動(dòng)物，取出臟器，于Hank’s液中制備成單個(gè)細(xì)胞懸液。
　　
　　2、膠板制備
　　
　　（1）取20~50μl于56℃水浴中保溫的0.5%普通熔點(diǎn)瓊脂糖，鋪于磨沙載玻片上，形成底膠。
　　
　?。?）取100~150μl0.5%普通熔點(diǎn)瓊脂糖加在底膠上，再于其上加蓋玻片，4℃冷凝10分鐘。
　　
　?。?）取下蓋片，取50~100μl于37℃水浴中保溫的1.0%的低熔點(diǎn)瓊脂糖與50~100μl細(xì)胞懸液（105個(gè)細(xì)胞/ml）混勻，立即鋪片，加上蓋玻片，4℃冷凝10分鐘。
　　
　?。?）去掉蓋玻片，取70~100μl于37℃水浴中保溫的0.5%的低熔點(diǎn)瓊脂糖鋪片，加蓋玻片，4℃冷凝。
　　
　　3、細(xì)胞裂解與電泳
　　
　?。?）將制備好的膠板去掉蓋玻片后，浸于4℃預(yù)冷的細(xì)胞裂解液中，4℃裂解1小時(shí)。
　　
　?。?）取出膠板，放入電泳槽中，浸泡在電泳液中解旋20分鐘。
　　
　　（3）4℃電泳20分鐘（25V，300mA）。
　　
　　4、中和與染色：
　　
　?。?）電泳結(jié)束，將膠板浸泡于中和液中，每次15分鐘，共中和兩次，注意更換中和液。
　　
　?。?）取出膠板，置于染色架上，滴加5μg/ml的PI，暗處染色20分鐘。
　　
　?。?）蒸餾水脫色15分鐘。
　　
　　5、鏡檢和分析：
　　
　　（1）在熒光顯微鏡下觀察，綠光激發(fā)吸收濾片590nm，必要時(shí)照相記錄。
　　
　　（2）記數(shù)觀察的細(xì)胞，記錄彗星細(xì)胞出現(xiàn)的頻率，用目鏡測(cè)微尺測(cè)頭長(zhǎng)與全長(zhǎng)，計(jì)算核DNA遷移距離。


產(chǎn)品對(duì)比 二維碼

掃一掃訪問(wèn)手機(jī)商鋪

對(duì)比框

在線留言