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PDF 文件人可溶性腫瘤壞死因子α受體(sTNFαR)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說明書
BS-0367人可溶性腫瘤壞死因子α受體(sTNFαR)ELISA試劑盒
一、實(shí)驗(yàn)原理
采用雙抗體夾心法:
包被階段:微孔板預(yù)包被抗人sTNFαR單克隆抗體(固相抗體)。
結(jié)合階段:樣本中sTNFαR抗原與固相抗體結(jié)合,后加入生物素標(biāo)記的二抗形成“抗體-抗原-酶標(biāo)抗體"復(fù)合物。
顯色階段:TMB底物經(jīng)HRP催化顯色,**終止液(2mol/L H?SO?)**終止反應(yīng)并轉(zhuǎn)為黃色,450nm測OD值。
二、試劑盒組成
組分 規(guī)格 儲存條件
酶標(biāo)包 被板96孔/48孔4℃避光
標(biāo)準(zhǔn)品 0.5ml×1瓶-20℃分裝保存
終止液 6ml×1瓶2-8℃
生物素標(biāo)記抗體 6ml×1瓶4℃避光
顯色劑(A/B液) 各6ml4℃避光
三、樣本處理規(guī)范
血清:全血室溫凝固30min,2000×g離心20min,避免溶血。
血漿:肝素抗凝,1000×g離心30min,去除顆粒物。
細(xì)胞裂解液:PBS洗滌后裂解,14000×g離心10min取上清。
四、操作步驟
加樣:標(biāo)準(zhǔn)品/樣本50μL + 生物素抗體100μL,37℃孵育60min。
洗滌:洗板5次,拍干(避免殘留)^^2^^。
顯色:TMB避光孵育15min,終止液50μL/孔,立即測OD值。
五、數(shù)據(jù)分析
標(biāo)準(zhǔn)曲線:四參數(shù)擬合,樣本OD值代入曲線計(jì)算濃度。
質(zhì)控要求:空白孔OD值應(yīng)<0.1,板內(nèi)/板間CV<10%。
六、注意事項(xiàng)
終止液安全:含強(qiáng)酸,操作時佩戴防護(hù)裝備。
時效性:加入終止液后需30分鐘內(nèi)檢測,防止吸光度衰減。
干擾因素:避免NaN3、溶血或高脂樣本。
注:以上資料僅供參考,不作為實(shí)驗(yàn)依據(jù),如果其他具體信息請咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。
人可溶性腫瘤壞死因子α受體(sTNFαR)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說明書 天津本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護(hù)和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創(chuàng)美好的未來。本生試劑盒
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