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避免樣本損失!凍存管液氮存儲(chǔ)的5大關(guān)鍵注意事項(xiàng)

來(lái)源:天津天正信達(dá)生物科技有限公司   2025年05月28日 10:50  

 

  避免樣本損失!凍存管液氮存儲(chǔ)的5大關(guān)鍵注意事項(xiàng)

 

  天正信達(dá)凍存管液氮存儲(chǔ)操作指南

  一、‌存儲(chǔ)前準(zhǔn)備‌

  凍存管選擇‌

  優(yōu)先選用聚丙烯(PP)材質(zhì)內(nèi)旋蓋凍存管,耐-196℃低溫且密封性強(qiáng),可有效防止液氮滲入。

  容量建議為1.5-2.0mL,避免過(guò)滿(留10%-20%空間防凍脹破裂)。

  樣本處理‌

  細(xì)胞樣本需調(diào)整至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期(活力>95%),并加入含保護(hù)劑(如10% DMSO+90% FBS)的凍存液。

  菌種樣本需與保護(hù)劑(如甘油)混合均勻,濃度控制在10?-10¹?個(gè)/mL。

 

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  二、‌降溫程序‌

  梯度降溫‌(減少冰晶損傷)

  4℃平衡30分鐘 → -20℃保持2小時(shí) → -80℃預(yù)冷4小時(shí) → 最終轉(zhuǎn)移至液氮罐氣相區(qū)(-150℃)過(guò)渡1小時(shí)。

  快速降溫‌(適配無(wú)血清凍存液)

  使用程序降溫盒(如Mr. Frosty),以-1℃/min速率直接降至-80℃。

  三、‌液氮存儲(chǔ)規(guī)范‌

  存儲(chǔ)模式選擇‌

  氣相存儲(chǔ)‌(-150℃~-190℃):適合頻繁存取的臨床樣本,溫度波動(dòng)±3℃。

  液相存儲(chǔ)‌(-196℃):適合長(zhǎng)期保存(>5年),但需確保凍存管密封性。

  安全措施‌

  凍存管需裝入二級(jí)容器(如凍存盒或紗布袋),避免直接接觸液氮引發(fā)爆炸。

  標(biāo)記信息建議激光雕刻,防止液氮環(huán)境下標(biāo)簽脫落。

  四、‌復(fù)蘇與維護(hù)‌

  快速?gòu)?fù)蘇‌

  從液氮中取出后立即置入37℃水浴,輕柔搖動(dòng)1-2分鐘至融化。

  定期檢查‌

  監(jiān)測(cè)液氮罐液位(保持≥1/3容量),并定期補(bǔ)充液氮。

  檢查凍存管密封性,發(fā)現(xiàn)結(jié)霜或滲漏立即更換。

  五、‌風(fēng)險(xiǎn)提示‌

  操作時(shí)需穿戴防護(hù)裝備(低溫手套、護(hù)目鏡),防止凍傷或爆管傷害。

  避免頻繁開(kāi)蓋,減少液氮揮發(fā)和溫度波動(dòng)。

  (注:長(zhǎng)期存儲(chǔ)建議每5年檢測(cè)樣本活性。)

  注:以上資料僅供參考,如需完整說(shuō)明書(shū),建議聯(lián)系供應(yīng)商獲取最新版本。

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