流式細(xì)胞儀是一種利用流式細(xì)胞術(shù)對懸浮在流體中的單細(xì)胞或微粒進(jìn)行高通量、多參數(shù)定量分析和分選的精密儀器。其核心原理是:將細(xì)胞制備成單細(xì)胞懸液后,在鞘液的包裹下形成單細(xì)胞液流,依次通過激光檢測區(qū)域,細(xì)胞或微粒受激光激發(fā)后產(chǎn)生散射光和熒光信號,這些信號被光電檢測器捕獲并轉(zhuǎn)化為電信號,再通過計算機軟件分析,實現(xiàn)對細(xì)胞的物理特性(如大小、內(nèi)部結(jié)構(gòu))和生物學(xué)特性(如抗原表達(dá)、核酸含量、細(xì)胞活性等)的定量檢測。
同時分析多種指標(biāo):通過配置不同波長的激光(如 488nm、633nm、561nm 等)和熒光檢測器,可同時檢測細(xì)胞的散射光信號(反映細(xì)胞大小、顆粒度)和多種熒光標(biāo)記物(如細(xì)胞表面抗原、核酸染料、功能探針等),單個細(xì)胞可獲取 10-30 個參數(shù)
應(yīng)用場景廣泛:例如在免疫分型中,可同時標(biāo)記 CD3、CD4、CD8 等多種抗體,精確區(qū)分 T 細(xì)胞亞群;在細(xì)胞周期分析中,結(jié)合 DNA 染料(如 PI)和增殖標(biāo)志物(如 Ki-67),同步分析細(xì)胞增殖狀態(tài)。
高純度分選:可根據(jù)設(shè)定的參數(shù)(如熒光強度、散射光特性)對目標(biāo)細(xì)胞進(jìn)行物理分選,純度可達(dá) 99% 以上,適用于稀有細(xì)胞獲?。ㄈ缪h(huán)腫瘤細(xì)胞、造血干細(xì)胞)。
活細(xì)胞保留:分選過程中通過優(yōu)化液流和壓力,可保持細(xì)胞活性,分選后的細(xì)胞可用于培養(yǎng)、測序或功能研究。
操作流程規(guī)范:儀器自帶校準(zhǔn)程序(如微球校準(zhǔn)激光和檢測器),減少人為誤差;數(shù)據(jù)分析軟件(如 FlowJo、FCS Express)可標(biāo)準(zhǔn)化處理數(shù)據(jù),支持批量分析和結(jié)果可視化(如流式圖、熱圖、火山圖等)。
質(zhì)量控制完善:通過定期校準(zhǔn)和性能驗證(如 CV 值檢測),確保數(shù)據(jù)的可靠性,符合臨床或科研的標(biāo)準(zhǔn)化要求。
流式細(xì)胞儀有哪幾個工作區(qū)域




