ELISA實(shí)驗(yàn)必看：規(guī)范品溶解與稀釋的操作步驟

來源：天津天正信達(dá)生物科技有限公司 2025年08月13日 09:23

　　以下是ELISA實(shí)驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品溶解與稀釋的規(guī)范操作步驟，綜合多個(gè)可靠來源整理而成：

　　1. 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備‌

　　平衡試劑‌：將標(biāo)準(zhǔn)品和稀釋液取出后，室溫平衡30分鐘。

　　核對(duì)試劑‌：按說明書確認(rèn)標(biāo)準(zhǔn)品濃度、稀釋液體積及所需孔位。

　　2. 標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶與稀釋‌

　　初次復(fù)溶‌：

　　取1管凍干標(biāo)準(zhǔn)品，加入500 μL標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(或說明書指定體積)。

　　靜置1–2分鐘，輕輕混勻后800g離心1分鐘，確保液體沉至管底。

　　梯度稀釋‌：

　　準(zhǔn)備6–7支離心管(標(biāo)記S1–S7或濃度梯度)，每管加入200 μL稀釋液。

　　從S1管取150 μL至S2管混勻，依次倍比稀釋至S6管，S7管作為空白對(duì)照。

　　注意：部分試劑盒要求最終稀釋液濃度需覆蓋檢測(cè)范圍(如0.15–10 ng/mL)。

　　3. 加樣與孵育‌

　　酶標(biāo)板操作‌：

　　每孔加入50 μL稀釋后的標(biāo)準(zhǔn)品(建議雙孔平行)。

　　加入樣本或檢測(cè)抗體后，封板37℃孵育30–60分鐘。

　　注意事項(xiàng)‌

　　混勻方式‌：避免劇烈震蕩，推薦渦旋或移液槍吹打。

　　時(shí)效性‌：顯色后需在15分鐘內(nèi)終止并讀取OD值。

　　注：以上資料僅供參考，如需進(jìn)一步了解產(chǎn)品詳情，可參考品牌供應(yīng)商或技術(shù)老師。

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