ISHpalette™短發(fā)夾擴(kuò)增子,簡(jiǎn)化原位雜交實(shí)驗(yàn),開(kāi)啟高靈敏度檢測(cè)新時(shí)代!
原位雜交實(shí)驗(yàn)是否令您困擾?
1.傳統(tǒng)方法步驟繁瑣、耗時(shí)費(fèi)力,還可能受到酶處理等復(fù)雜操作的限制。
2.ISHpalette™來(lái)拯救你的實(shí)驗(yàn)!
一.優(yōu)勢(shì)特點(diǎn):
1.多重?zé)晒庠浑s交(ISH)技術(shù)
•低背景噪聲,高靈敏度
•優(yōu)異的重現(xiàn)性與定量性
•高品質(zhì)與高性?xún)r(jià)比
2.兼容性
•兼容免疫染色與雙重染色
•無(wú)需優(yōu)化實(shí)驗(yàn)方案
3.簡(jiǎn)單快捷的操作體驗(yàn)
•無(wú)需酶處理,步驟更少,實(shí)驗(yàn)人員均可輕松掌握
•無(wú)需添置新設(shè)備
4.提供探針設(shè)計(jì)服務(wù)
二.ISHpalette™工作流程
無(wú)需特殊設(shè)備或試劑。無(wú)需進(jìn)行蛋白酶K通透性處理、乙酰化處理、高溫處理或RNase處理,從而簡(jiǎn)化實(shí)驗(yàn)流程,加快染色過(guò)程。
三.什么是原位雜交鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(HCR)?
1.基于發(fā)夾DNA的無(wú)酶信號(hào)放大ISH技術(shù)
通過(guò)發(fā)夾結(jié)構(gòu)核酸的自組裝延伸,介導(dǎo)組織切片上標(biāo)記DNA的鏈?zhǔn)椒磻?yīng),從而實(shí)現(xiàn)目標(biāo)核酸的可視化檢測(cè)。該技術(shù)不依賴(lài)抗體或酶促反應(yīng),具有線性信號(hào)增強(qiáng)特性和超高信噪比。
2.雙探針精確定位機(jī)制
當(dāng)兩種探針(均含HCR啟動(dòng)序列)與目標(biāo)結(jié)合后,可觸發(fā)熒光標(biāo)記發(fā)夾DNA的級(jí)聯(lián)放大反應(yīng),精準(zhǔn)定位目標(biāo)mRNA,降低非特異性反應(yīng)。
四.實(shí)驗(yàn)效果
1.單分子級(jí)檢測(cè)精度
在小鼠腦切片上同步檢測(cè)到Vglut2(綠色)、Sik3(紅色)和Vgat(品紅色)mRNA信號(hào),單個(gè)mRNA分子以點(diǎn)狀顆粒形式呈現(xiàn)。
2.性能對(duì)比
傳統(tǒng)HCR法與ISHpalette™同步檢測(cè)小鼠腦切片中Penk(上圖)、Vglut2(中圖)及Nts(下圖)mRNA表達(dá),并進(jìn)行信號(hào)強(qiáng)度對(duì)比。結(jié)果清晰顯示,采用短發(fā)夾DNA的ISHpalette™具有更優(yōu)的組織滲透性與反應(yīng)活性。所有實(shí)驗(yàn)均未使用蛋白酶K處理。
3.無(wú)需酶處理
在小鼠腦切片上,c-Fos蛋白通過(guò)免疫染色檢測(cè)(左側(cè),綠色),Vglut2 mRNA通過(guò)原位HCR檢測(cè)(中間,品紅色)。在經(jīng)過(guò)蛋白酶K處理的樣本(上排)中,檢測(cè)到微弱的c-Fos蛋白信號(hào);而在未經(jīng)處理的樣本(下排)中,蛋白和mRNA均能被清晰地檢測(cè)到。
五.適用樣本類(lèi)型
•石蠟切片
•冰凍切片
•漂浮切片
•貼壁/懸浮細(xì)胞
•全組織樣本
六.ISHpalette™短發(fā)夾擴(kuò)增子訂購(gòu)信息