甲狀腺素游離T4檢測試劑盒elisa(酶聯(lián)免疫法),科潤達生物代理
【產(chǎn)品名稱】
通用名稱:游離T4檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
英文名稱:Free T4 ELISA
【產(chǎn)品規(guī)格】
96T
【預(yù)期用途】
甲狀腺素游離T4檢測試劑盒elisaEIA-3775可用于人血清和血漿(EDTA,肝素或檸檬酸鹽血漿)中FT4(游離甲狀腺素)的體外定量檢測。
【前言簡介】
L-甲狀腺素(T4)或3,5,3,5-四碘甲甲狀腺素是由甲狀腺合成的,并分泌到血液中。在此,T4與血清轉(zhuǎn)運蛋白結(jié)合,僅留下約0.03%的游離T4(fT4)。主要轉(zhuǎn)運蛋白是甲狀腺素結(jié)合球蛋白(TBG),通常占結(jié)合T4的70%。其他甲狀腺激素結(jié)合蛋白是甲狀腺素結(jié)合白蛋白和白蛋白。
T4對幾乎所有組織的蛋白質(zhì)合成和耗氧量都有主要影響,但對于生長,發(fā)育和性成熟也很重要。
甲狀腺由促甲狀腺激素釋放激素(TRH)和促甲狀腺激素(TSH)調(diào)節(jié)。除了通過甲狀腺激素反饋調(diào)節(jié)TRH / TSH外,營養(yǎng)信號(如瘦素)以及調(diào)節(jié)食欲的肽還具有中樞調(diào)節(jié)作用。如果TSH濃度超出正常范圍,則fT4濃度的測量被認為是有價值的參數(shù)。由于fT4代表血清中T4的代謝活性部分,因此它反映了甲狀腺的實際激素產(chǎn)生。原發(fā)性甲狀腺功能減退癥會導致甲狀腺T4生成不足,從而導致血液中循環(huán)fT4濃度異常低。原發(fā)性甲狀腺功能亢進癥會導致甲狀腺過度產(chǎn)生T4并導致fT4濃度升高。
【檢測原理】
本試劑盒是基于競爭結(jié)合原理的固相酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)。微量滴定孔用抗T4分子特異性抗原位點的單克隆(小鼠)抗體包被。患者樣品的內(nèi)源FT4與T4辣根過氧化物酶聯(lián)物競爭與包被抗體的結(jié)合。孵育后,將未結(jié)合的結(jié)合物洗掉。結(jié)合的過氧化物酶結(jié)合物的量與樣品中FT4的濃度成反比。添加底物溶液后,顯色的強度與患者樣品中FT4的濃度成反比。
【儲存條件】
當儲存在2°C-8°C下時,未打開的試劑將保留反應(yīng)性直到有效期。在此日期之后請勿使用試劑。
打開的試劑必須存儲在2°C-8°C下。微量滴定孔必須存儲在2°C-8°C下。鋁箔袋打開后,應(yīng)小心再次將其密封。如果按照上述說明存放,打開的試劑盒可保留8周的活性。
【實驗步驟】
每次運行必須包含一條標準曲線。
1. 在框架固定器中固定所需數(shù)量的微量滴定孔。
2. 用新的一次性吸頭分配每種標準品,質(zhì)控品和樣品的50 µL到適當?shù)目字小?/span>
3. 在每個孔中分配100 µL酶聯(lián)物。充分混合10秒鐘。在此步驟中進行充分混合非常重要。
4. 在室溫下孵育60分鐘。
5. 輕搖孔中的內(nèi)容物。每孔用400 µL稀釋的洗滌液沖洗孔4次。在吸收紙上用力猛擊孔,以除去殘留的液滴。重要說明:此檢測方法的靈敏度和精密度受洗滌正確性能的明顯影響程序!
6. 向每個孔中加入150 µL底物液。
7. 在室溫下孵育30分鐘。
8. 通過向每個孔中添加100 µL終止液來終止酶促反應(yīng)。
9. 用酶標儀測定450±10 nm處每個孔的吸光度(OD)。建議在添加終止液后的10分鐘內(nèi)讀取孔。
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