【??參數(shù)信息】

英文名稱：Benzonase Nuclease（不含標(biāo)簽）

CAS NO：9025-65-4

酶活性值：≥250 U/μL

比活性值：≥1.0×106U/mg蛋白

蛋白酶：未檢出

合適pH：8.0（工作范圍pH6-10）

合適溫度：37℃（工作范圍0-42℃）

活性單位定義：在37℃，pH8.0反應(yīng)條件，30min內(nèi)使△A260吸收值變化1.0所用的酶量定義為一個活性單位（U）。

純度：≥95%

儲存條件：-20℃避光干燥

生產(chǎn)廠商：西安強(qiáng)化生物科技

【簡單概述】

背景描述：

Benzonase Nuclease（不含標(biāo)簽）。一種非特異性核酸內(nèi)切酶。

由兩個一樣的亞基構(gòu)成，每個亞基大約30kDa，含有245個氨基酸和兩個必需的二硫鍵。

可以切割和降解各種形式的DNA和RNA（單鏈，雙鏈，線性，環(huán)狀，或超螺旋形式），生成含有5’-磷酸末端的3-5個寡核苷酸殘基片段，并且在很多種操作條件下有效。

對核酸堿基序列無特異性要求，可在鏈內(nèi)任意核苷酸間進(jìn)行切割，廣泛用于去除生物制品中的核酸。

本品經(jīng)基因工程改造的原核表達(dá)純化所得，不帶任何標(biāo)簽。

能有效降低蛋白樣本粘度，去除蛋白樣品中核酸的污染，無蛋白酶活性殘留，核酸酶活性高達(dá)1×106 U/mg蛋白。

本品未經(jīng)特殊的內(nèi)毒素去除處理，適用于常規(guī)的科研應(yīng)用，包括常規(guī)蛋白樣本（非藥物蛋白）提取時核酸污染的去除，2D凝膠電泳蛋白樣本的制備，WB，WBIP等。

【使用方法】

一、通用操作流程

樣本處理：

細(xì)胞樣本（貼壁/懸?。?/span>

去除培養(yǎng)基后用 PBS 清洗，每 1 mL 裂解液（如 RIPA） 加入 1–5 μL Benzonase Nuclease，室溫或冰上孵育 5–30 分鐘，離心取上清進(jìn)行下游實驗。

組織樣本：

取 30–100 mg 組織充分研磨，加入 100–200 μL 裂解液 和 0.5–5 μL Benzonase Nuclease，室溫或冰上孵育 5–30 分鐘，離心取上清。

細(xì)菌樣本（如大腸桿菌）：

裂解后每 100 μL 裂解液 加入 1–5 μL 酶，室溫孵育 30 分鐘，離心取上清。

關(guān)鍵參數(shù)優(yōu)化：

反應(yīng)體系：建議 pH 6–8，Mg2?終濃度 5–10 mM。

酶用量：常規(guī)推薦稀釋比例 1:1000–1:20,000（按酶活性 1000 U/μL 計）。

（例：若目標(biāo)濃度 25 U/mL，則每毫升樣品加 0.025 μL 酶液 ）

溫度與時間：有效溫度 0–42°C（ 37°C），孵育時間可依需求延長以提高效率。

二、注意事項

保存條件：

-20℃ 保存（含 50% 甘油保存液）。

適用場景：

適用于科研級蛋白純化、降低樣本黏度、去除核酸污染（如 WB、IP、2D 電泳），不適用于內(nèi)毒素敏感的實驗（未特殊去內(nèi)毒素）。

實驗優(yōu)化：

使用需預(yù)實驗優(yōu)化酶量、溫度及時間。

【相關(guān)試劑】

MPP+ iodide

Tide Quencher 1胺

Tide Quencher 3胺

SDS Lysis Buffer SDS裂解液

Benzonase Nuclease

RIPA Lysis Buffer (Strong)RIPA裂解液(強(qiáng))

RIPA Lysis Buffer(Medium)RIPA裂解液(中)

RIPA Lysis Buffer (Weak) RIPA裂解液(弱)

Acid-fast Stain Kit (Kinyoun Cold Method)

Acid-fast Stain Kit (Auramine O Method)

Annexin V-Alexa Fluor 488/PI Apoptosis Detection Kit

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本試劑僅適用于科研實驗，敬請知悉。