【??參數(shù)信息】
英文名稱:DyLight 594 labeled Lycopersicon Esculentum (Tomato) Lectin (LEL, TL)
中文名稱:DyLight 594標(biāo)記的番茄凝集素
熒光顏色:紅色
糖特異性:[GlcNAc]1-3, N-Acetylglucosamine
應(yīng)用:免疫熒光、糖生物學(xué)
激發(fā)波長(zhǎng):592 nm
發(fā)射波長(zhǎng):617 nm
純度:≥95%
儲(chǔ)存條件:-20℃避光干燥
生產(chǎn)廠商:西安強(qiáng)化生物科技
【簡(jiǎn)單概述】
DyLight 594標(biāo)記的番茄凝集素是一種熒光標(biāo)記的糖蛋白探針,由番茄(Lycopersicon esculentum)中提取的凝集素(LEL/TL)與紅色熒光染料DyLight 594共價(jià)結(jié)合形成。
其核心特征包括:
結(jié)構(gòu)特性:
凝集素本身為穩(wěn)定的單亞基糖蛋白,含約50%阿拉伯糖和半乳糖,分子量約71 kDa,可能在溶液中形成多聚體。
DyLight 594是一種光穩(wěn)定性強(qiáng)、發(fā)射亮紅色熒光的熒光染料,標(biāo)記后幾乎不含游離染料。
糖結(jié)合特異性:
特異性識(shí)別 N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc) ,比如β-1,3-連接的GlcNAc寡聚體,無(wú)血型特異性。
其結(jié)合可被殼多糖水解物抑制,表明結(jié)合依賴糖鏈結(jié)構(gòu)。
實(shí)驗(yàn)優(yōu)勢(shì)與適用性
標(biāo)記:在膠質(zhì)肉瘤等腫瘤模型中,LEL 的血管標(biāo)記效果優(yōu)于傳統(tǒng)標(biāo)記物(如 EHS 層粘連蛋白、PECAM-1),且重復(fù)性好 。
多場(chǎng)景兼容性:
適用于 活體注射(劑量和注射時(shí)間需優(yōu)化)。
兼容 石蠟切片、振動(dòng)切片及雙標(biāo)記實(shí)驗(yàn) 。
可與 生物su化版本 聯(lián)用,通過(guò)鏈霉親和素-過(guò)氧化物酶復(fù)合物顯色 。
快速清除:血液循環(huán)中半衰期短,利于快速成像。
【常見(jiàn)問(wèn)題與解決方法】
(1)熒光信號(hào)弱或不顯色
問(wèn)題原因:濃度過(guò)低、儲(chǔ)存不當(dāng)導(dǎo)致試劑失效,或激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)設(shè)置錯(cuò)誤。
解決方案:使用推薦濃度范圍(5-20 μg/ml),并確保儲(chǔ)存于2-8°C以維持穩(wěn)定性;驗(yàn)證熒光顯微鏡設(shè)置(激發(fā)592 nm,發(fā)射617 nm)。
(2)高背景噪音或非特異性結(jié)合
問(wèn)題原因:未偶聯(lián)熒光素殘留、非特異性糖結(jié)合,或洗滌不充分。
解決方案:選用高質(zhì)量產(chǎn)品,并添加抑制糖如Chitin Hydrolysate減少非特異性結(jié)合;實(shí)驗(yàn)后加強(qiáng)洗滌。
(3)試劑聚集或降解
問(wèn)題原因:儲(chǔ)存溫度不當(dāng)或反復(fù)凍融導(dǎo)致凝集素變性。
解決方案:嚴(yán)格儲(chǔ)存于2-8°C,避免與水接觸;使用前檢查溶液狀態(tài),如有沉淀應(yīng)更換新批次。
(4)組織切片染色不均
問(wèn)題原因:抗原修復(fù)不足或切片處理不當(dāng)。
解決方案:優(yōu)化抗原修復(fù)條件,并根據(jù)組織類型調(diào)整修復(fù)參數(shù);確保切片水化。
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