【??參數(shù)信息】
英文名稱:PEI 25K Transfection Reagent
中文名稱:PEI25K線性化聚乙烯亞胺轉(zhuǎn)染試劑
CAS NO:9002-98-6
外觀:白色固體
分子量:25K
溶解性:溶于熱水、低pH冷水、甲醇和乙醇;不溶于苯、丙酮
純度:≥95%
儲存條件:-20℃避光干燥
生產(chǎn)廠商:西安強化生物科技
【簡單概述】
PEI25K線性化聚乙烯亞胺轉(zhuǎn)染試劑,一種高電荷陽離子聚合物,容易結(jié)合于高電荷陰離子基質(zhì)。
工業(yè)應(yīng)用上,線性化PEI可改善負(fù)電荷染料的物理外觀,以調(diào)整染料的化學(xué)特性和增強染料與固相基質(zhì)的黏附能力,常用作黏附增強劑,作用同多聚賴氨酸(poly-lysine);
科研應(yīng)用上,線性化PEI能與DNA或其他負(fù)電荷生物大分子簡單結(jié)合,正是這一特性,使得成為一種非常行之有效的載體運輸介質(zhì)(Vector carrier),即轉(zhuǎn)
染試劑。
線性化聚乙烯亞胺PEI 25000是一款優(yōu)秀、低成本、值得信賴的瞬時性轉(zhuǎn)染試劑。
在HEK293和CHO表達系統(tǒng)中,PEI在寬廣的生產(chǎn)規(guī)模內(nèi)(從96孔板到100L生物反應(yīng)器)能提供連續(xù)性的高基因表達。
本品是PEI25K的無菌溶液,濃度為1mg/ml,直接使用即可。按照DNA:PEI25K=1:3的比例來操作,1ml本品足以用來轉(zhuǎn)染330μg DNA,或者,6孔板內(nèi)約做80-160次轉(zhuǎn)染。
【作用機制】
PEI 25K的作用機制基于其 陽離子特性和“質(zhì)子海綿效應(yīng)”(Proton Sponge Effect):
復(fù)合物形成:
PEI分子富含質(zhì)子化氨基(每三個原子含一個可質(zhì)子化氮原子),在生理pH下帶正電荷。
通過靜電作用與帶負(fù)電荷的DNA(或其他核酸)結(jié)合,形成穩(wěn)定的PEI/DNA復(fù)合物。
PEI 25K轉(zhuǎn)染試劑原理:實現(xiàn)基因傳遞與表達
細(xì)胞攝?。?/span>
復(fù)合物通過細(xì)胞膜表面的內(nèi)吞作用進入細(xì)胞。
內(nèi)體逃逸:
PEI的“質(zhì)子海綿效應(yīng)”是其核心機制:在酸性內(nèi)體/溶酶體環(huán)境中,PEI大量吸收質(zhì)子,導(dǎo)致內(nèi)體滲透壓升高并腫脹破裂,釋放復(fù)合物至細(xì)胞質(zhì)。
DNA釋放與表達:
釋放的DNA進入細(xì)胞核,與轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合啟動基因表達。
轉(zhuǎn)染后24小時開始表達,36-48小時達峰值(比脂質(zhì)體試劑延遲6-12小時)。
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本試劑僅適用于科研實驗,敬請知悉。